正交驗(yàn)證 Orthogonal validation

抗體染色通過(guò)非抗體的方式進(jìn)行驗(yàn)證，例如與RNA表現(xiàn)量相比較。

A. 使用 anti-RAB27A （HPA001333） 抗體分別對(duì)胃及骨骼肌組織進(jìn)行IHC染色，再將染色結(jié)果與相同組織的RNAseq （TPM）表現(xiàn)結(jié)果進(jìn)行比對(duì)

B. 使用Anti-RAB27A抗體分別對(duì)人類(lèi)細(xì)胞株SK-MEL-30及Caco-2進(jìn)行WB試驗(yàn)，并將結(jié)果與同細(xì)胞株的RNAseq （TPM）結(jié)果進(jìn)行比對(duì)。 內(nèi)參對(duì)照抗體： Anti-HSP90B1。

獨(dú)立抗體驗(yàn)證Independent antibody validation

使用兩種以上辨識(shí)不同抗原表位的抗體，比較目標(biāo)蛋白在相同組織中的表現(xiàn)情形

A. 使用 Anti-AAMDC （HPA037918）分別對(duì)人類(lèi)腎上腺、肝、淋巴結(jié)及睪丸組織進(jìn)行IHC染色。

B. 在相同組織中，染色結(jié)果與辨識(shí)不同抗原表位的Anti-AAMDC （HPA037919）呈現(xiàn)相似的蛋白分布。

重組蛋白表現(xiàn)驗(yàn)證Recombinant expression validation

將目標(biāo)蛋白大量表現(xiàn)于細(xì)胞中，以抗體偵測(cè)蛋白表現(xiàn)量是否增加

C. 利用西方墨點(diǎn)法測(cè)試HEK293T細(xì)胞裂解液中的AAMDC蛋白質(zhì)表現(xiàn)，使用Anti-AAMDC （HPA037918）抗體分析。 實(shí)驗(yàn)組為AADMA表現(xiàn)載體 （C-terminal myc-DDK tag~3.1 kD）轉(zhuǎn)染至HEK293T細(xì)胞中大量表現(xiàn); 對(duì)照組為轉(zhuǎn)染空白載體。